一种利用CRISPR筛选致病性和非致病性Th17细胞调节因子的方法

本发明公开了一种利用CRISPR筛选致病性和非致病性Th17细胞调节因子的方法，涉及CRISPR筛选技术领域，包括如下步骤：CRISPR文库构建；Il17aCreRosa26YFP/Cas92D2T细胞转导；体内移植与EAE模型构建；致病性与非致病性Th17细胞分选；高通量测序及富集分析鉴定。本发明利用CRISPR‑Cas9技术的高通量能力显著提升筛选效率，提高Th17细胞异质性调控转录因子检出的可能性和准确率：利用Il17aCreRosa26YFP/Cas92D2细胞，其中IL‑17a‑Cre的表达控制YFP和CAS9的表达，确定YFP+、Thy1.1+细胞是sgRNA转导的Th17细胞，因此，只有YFP+、Thy1.1+、Th17或ex‑Th17细胞中的基因才会被编辑，从而提高筛选的特异性和效率，并且通过体内实验模型更接近真实免疫环境，结果更具生物学意义；可筛选得到Th17细胞致病性和非致病性的命运决定因子。